《中国组织工程研究》Vol.20,No10干细胞培养与移植?中文核心期刊要目总览收录?中国科技论文统计源期刊脂肪干细胞脂肪间充质干细胞可调节变应性鼻炎T细胞的免疫状态目的：探讨脂肪间充质干细胞对小鼠变应性鼻炎T细胞免疫状态的影响。方法：①将60只小鼠随机分为6组(分组表示为致敏/激发/处理)：卵清蛋白/卵清蛋白/高剂量脂肪间充质干细胞组(简称高剂量脂肪间充质干细胞组)、卵清蛋白/卵清蛋白/低剂量脂肪间充质干细胞组(简称低剂量脂肪间充质干细胞组)、卵清蛋白/卵清蛋白/PBS组、卵清蛋白/卵清蛋白组/0组、PBS/PBS组/0组、正常对照组。前5组分别于第0，7，14天的相同时间腹腔注射μL卵清蛋白致敏液或PBS进行基础致敏，第15-19天每天给予20μL卵清蛋白激发液或PBS进行激发，正常对照组不做任何处理。在致敏激发后的第20-22天，前3组分别经尾静脉注射0.1mL的高、低浓度脂肪间充质干细胞液及PBS。②末次处理48h后，采用ELISA法检测血清白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素10和干扰素-γ水平，荧光定量PCR法检测脾脏上述各细胞因子mRNA的表达，荧光显微镜观察荧光标记脂肪间充质干细胞在鼻黏膜的迁移情况，苏木精-伊红染色观察鼻黏膜的病理学变化。骨髓干细胞利用生物素-链霉亲和素进行骨髓间充质干细胞的表面标记目的：利用生物素-链霉亲和素反应体系建立一种简单可行的细胞表面化学修饰方法，并评价此方法进行骨髓间充质干细胞表面标记的效率及其对细胞生物学功能的影响。方法：全骨髓培养法得到第3代骨髓间充质干细胞，采用流式细胞仪鉴定；以磺化生物素-N-羟基琥珀酰亚胺、生物素、链霉亲和素将黏附分子配体唾液酸化的路易斯抗原装备到骨髓间充质干细胞表面；通过荧光显微镜评估骨髓间充质干细胞表面标记的效率，锥虫蓝染色法检测骨髓间充质干细胞的活性，CCK-8比色法检测骨髓间充质干细胞的增殖功能；成脂、成骨诱导检测骨髓间充质干细胞多分化功能。基因芯片技术分析骨髓间充质干细胞神经分化中Wnt信号通路的激活目的：应用基因芯片技术测试人骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化过程中相关基因的表达变化。方法：分离和纯化人骨髓间充质干细胞，选取第5代细胞，基于GatewayTM载体构建技术构建慢病毒载体，将Wnt-1转导至人骨髓间充质干细胞。设置3个实验组，分别为对照组、未转导组以及转导组，诱导人骨髓间充质干细胞神经分化，扫描电镜下观察细胞形态，应用基因芯片检测Wnt信号通路基因的调控变化及差异表达。黄芪多糖干预多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的变化目的：探讨黄芪多糖对多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞增殖情况以及细胞因子分泌情况的影响。方法：取正常人与多发性骨髓瘤患者骨髓，通过密度梯度离心法分离得到骨髓间充质干细胞，行传代培养及鉴定。收集第3代骨髓间充质干细胞，使用酶标仪法描绘出生长曲线。使用MTT法及流式细胞术分别检测不同质量浓度(0.5，1，2，4，6，8g/L)黄芪多糖对骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响。使用ELISA法检测细胞中白细胞介素1β和白细胞介素6的表达水平。基质细胞衍生因子1促进骨髓干细胞增殖：μg/L为最佳质量浓度目的：观察基质细胞衍生因子1对比格犬骨髓干细胞增殖的影响并探讨最佳质量浓度。方法：利用，，μg/L基质细胞衍生因子1对比格犬骨髓干细胞进行干预，MTT比色实验检测骨髓干细胞的增殖情况，筛选出最佳质量浓度，再次采用MTT比色实验检测最佳质量浓度干预后骨髓干细胞的增殖情况。肿瘤干细胞滋养干细胞转录因子叉头蛋白D3过表达在人绒癌细胞株JAR的恶性生物学特性中的作用研究目的：研究叉头蛋白D3在绒毛膜细胞癌恶性生物学特性中的作用及可能作用机制。方法：利用短发夹RNA干扰叉头蛋白D3在人绒毛膜细胞癌细胞株JAR中的表达，体外细胞增殖、迁移/侵袭实验检测JAR的细胞功能学改变，体内动物成瘤实验检测肿瘤生长情况。Agilent转录表达芯片初筛叉头蛋白D3调控下游基因并通过定量实时PCR验证。多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记不影响神经母细胞瘤干细胞的活化和增殖目的：探讨纳米颗粒标记对神经母细胞瘤干细胞生物学特性的影响以及13-顺维甲酸对神经母细胞瘤干细胞的诱导分化作用。方法：采用无血清悬浮培养法体外分离培养神经母细胞瘤干细胞，多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记神经母细胞瘤干细胞，在含有13-顺维甲酸的培养液中诱导分化培养，RT-PCR法检测标记前后和诱导前后Oct-4的表达变化，用细胞免疫荧光法观察标记前后和诱导前后nestin的表达变化。上皮间质转化在胃癌SGC细胞向胃癌干细胞转化过程中的作用目的：探讨上皮间质转化在胃癌SGC细胞向胃癌干样细胞转化过程中的作用。方法：长春新碱诱导胃癌SGC细胞，并对长春新碱诱导的胃癌SGC细胞进行培养筛选制备胃癌干样细胞，鉴定细胞CD44表型、观察细胞形态变化、检测干细胞相关标志物、检测上皮间质转化相关分子。卵巢癌CD90+肿瘤干细胞的生物学特性目的：探讨卵巢癌CD90+肿瘤细胞的生物学特性。方法：从卵巢癌患者腹水中分离原代卵巢癌细胞，以流式分选法得到CD90+、CD90-细胞，采用RT-PCR法检测干细胞相关基因及上皮间质化相关基因表达，采用Transwell小室侵袭实验观察细胞侵袭力，克隆形成实验观察细胞增殖分化能力，悬浮成球实验观察干细胞潜能，动物体内成瘤实验观察成瘤率。干细胞移植骨髓间充质干细胞移植后在胸腺内的定居目的：观察骨髓间充质干细胞移植后在衰老模型大鼠免疫器官胸腺组织内的存活情况。方法：以腺病毒介导绿色荧光蛋白基因体外转染骨髓间充质干细胞，通过大鼠尾静脉注射移植给衰老模型大鼠，于移植后第3，7，14，21天取材，荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞归巢到胸腺的存活情况。移植骨髓间充质干细胞第3天，取材胸腺组织，进行苏木精-伊红染色，观察移植细胞部位的组织病理变化。立体定向脑内移植神经干细胞改善颅脑损伤大鼠的神经运动功能目的：探讨立体定向脑内移植神经干细胞对颅脑损伤大鼠神经运动功能的影响。方法：将20只雄性SD大鼠随机分为研究组和对照组，每组10只，应用改良的自由落体方法制备脑损伤模型，伤后1d研究组大鼠脑实质内移植胚胎神经干细胞，对照组大鼠注射等量不含干细胞的培养液。在脑损伤前1d、伤后1d、1周、2周运用神经学缺损评分法评价大鼠运动神经功能。移植后2周，取脑组织分别行苏木精-伊红染色、抗BrdU、胶质纤维酸性蛋白、β微管蛋白Ⅲ和酪氨酸羟化酶免疫组化染色。高渗环境结合氯化钴低氧预处理骨髓间充质干细胞移植治疗椎间盘退变目的：观察氯化钴和高渗溶液预处理对骨髓间充质干细胞移植治疗椎间盘退变疾病效果的影响。方法：①细胞体外实验，将骨髓间充质干细胞分为3组，对照组正常培养，高渗组采用体积分数1%高渗母液干预，低氧组采用μmol/L氯化钴干预，高渗低氧组采用体积分数1%高渗母液和μmol/L氯化钴联合干预，培养1周后，使用体积分数2%高渗母液和μmol/L氯化钴作为应激条件分别对预处理骨髓间充质干细胞和未处理骨髓间充质干细胞进行刺激24h，以RT-PCR检测caspase-3的表达评估细胞凋亡情况；②动物体内实验：将SD大鼠分为3组，对照组建立椎间盘退变模型大鼠，细胞移植组造模后骨髓间充质干细胞移植治疗，高渗低氧治疗组造模后采用高渗低氧预处理后的骨髓间充质干细胞治疗，细胞分别移植至大鼠针刺椎间盘退变模型的椎间盘中，2周后取材，以免疫组织化学染色鉴定细胞分布情况、RT-PCR检测相关基因表达情况，评估预处理对于干细胞治疗效果的影响。骨髓间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮目的：评价骨髓间充质干细胞对系统性红斑狼疮小鼠的治疗作用。方法：16只系统性红斑狼疮小鼠随机平均分为对照组与实验组，实验组小鼠经尾静脉注射移植第3代骨髓间充质干细胞，对照组注射等量的生理盐水。收集小鼠尿液采用Bradford法检测尿蛋白水平，采集两组小鼠尾尖血液，利用放射免疫方法测定血清抗ds-DNA抗体浓度；组织学切片进行苏木精-伊红染色及免疫组化学染色，显微镜下观察小鼠肾脏病理学改变，采用流式细胞仪检测眼内眦血液、新鲜脾脏与胸腺中CD4+CD25+T细胞水平。神经干细胞移植治疗颅脑损伤后遗症：最佳时机选择目的：探讨神经干细胞移植治疗颅脑损伤后遗症的临床效果及其最佳治疗时机。方法：选择例颅脑损伤后遗症患者，均接受神经干细胞移植治疗，按照治疗时机分为损伤后6个月以内组(60例)、损伤后6-12个月组(59例)、损伤后12个月以上组(59例)，分别在损伤后6个月以内、损伤后6-12个月、损伤后12个月以上进行神经干细胞移植治疗。记录3组患者的临床症状改善情况和功能独立性评定量表评分。骨髓间充质干细胞移植改善慢性哮喘气道炎症目的：探讨骨髓间充质干细胞对慢性哮喘大鼠的治疗效果。方法：通过卵白蛋白腹腔注射加雾化刺激的方式制备大鼠慢性哮喘模型，待模型稳定后，尾静脉注射4×及8×个骨髓间充质干细胞。治疗30d后，苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化，RT-qPCR、ELISA法检测肺组织和外周血中白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、γ-干扰素水平。干细胞培养与分化过氧化氢刺激人牙髓干细胞的衰老进程目的：分离培养人牙髓干细胞，分析加入过氧化氢(H2O2)对其衰老程度的影响。方法：牙髓干细胞分为3组，分别用PBS、μmol/LH2O2、μmol/LH2O2刺激2h。倒置显微镜下观察细胞形态，β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老程度，BrdU试剂盒和细胞计数法检测细胞增殖能力，免疫荧光检测细胞骨架排列情况和sirt1蛋白的表达，WesternBlot法测定sirt1、p16蛋白的表达。异氟醚抑制海马神经干细胞增殖并可促其向神经元分化目的：探讨异氟醚对海马神经干细胞增殖、分化的影响。方法：26只SD大鼠随机分为空气组和异氟醚组，每组13只。异氟醚组大鼠先吸入体积分数2.5%异氟醚3min后再吸入体积分数1.5%异氟醚维持4h，空气组仅吸入空气。干预后检测两组大鼠血糖、动脉血气指标；干预前以及干预结束后腹腔注射5-溴脱氧尿苷，末次注射5-溴脱氧尿苷后24h取脑组织，制备冰冻切片，进行免疫荧光染色。红景天多糖对精原干细胞体外增殖的影响目的：探讨红景天多糖对精原干细胞体外增殖的影响。方法：无菌条件下从小鼠睾丸组织中分离精原干细胞和Sertoli细胞，将精原干细胞接种于Sertoli细胞饲养层上共培养后分为3组，分别为实验组1(单纯细胞培养基)，实验组2(细胞培养基+mg/L红景天多糖)和实验组3(细胞培养基+mg/L红景天多糖+1U/L白血病抑制因子+10μg/L胶质细胞源神经营养因子)。共培养7d后，采用流式细胞术检测细胞体外增殖状态，计算细胞活性率以及精原干细胞已知抗原标志物GFRa-1、Thy-1和C-kit的阳性表达率。干细胞综述脂肪干细胞分离、纯化和保存：研究进展与未来方向目的：从脂肪组织的取材、脂肪干细胞的分离、纯化、传代培养和冻存等方面进行综述，讨论上述过程中影响脂肪干细胞产量、增殖和分化能力的主要因素，同时提出目前的问题和未来的研究方向。方法：于年9月10日在PubMed中以(adiposestemcells[Title])OR(adipose-derivedstemcells[Title])OR(adipose-derivedmesenchymalstemcells[Title])作为检索式进行检索，在SinoMed中以(“脂肪干细胞”[中文标题:智能])or(“脂肪间充质干细胞”[中文标题:智能])作为检索式进行检索。通过标题及摘要判断其主要内容，最终选取81篇代表性文献。文章还介绍了美国德克萨斯大学MD安德森肿瘤中心整形科和TRAMCEL实验室(TissueRegenerationandMolecularCellEngineeringLab)的相关经验。中国组织工程研究
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